ELISA試劑盒法多年來廣泛應(yīng)用于血站和醫(yī)院的實(shí)驗(yàn)室中，相對于其它檢測方法，ELISA法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的特點(diǎn)，并具有操作簡便、無放射性危害的優(yōu)點(diǎn)，但是在一些測定實(shí)驗(yàn)中，結(jié)果會出現(xiàn)誤差影響測定結(jié)果。這篇文章總結(jié)了很多的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)從幾個(gè)方面分析影響結(jié)果的因素。
ELISA試劑盒法在實(shí)驗(yàn)中手工測定的影響因素分析
(1)抗原、抗體活性對效價(jià)的影響：主要是試劑中抗體(或抗原)的效價(jià)降低或失活，結(jié)果不易判。(2)加樣時(shí)注意勿觸及包被板底部，以免擦傷包被物使抗體(抗原)脫落而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。(3)洗滌不充分，會使結(jié)果假性增高，過分洗滌呈假陰性。(4)比色時(shí)應(yīng)保持包被孔底部無異物、無水汽，特別是冬季板從37℃水浴箱取出時(shí)，底部留有水汽，應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色，水汽或孔內(nèi)氣泡也會使OD值升高。(5)抗原與抗體反應(yīng)達(dá)到*平衡，依賴于溫度與時(shí)間。溫度高于45℃易引起失活及標(biāo)記物脫落，溫度低于4℃，影響反應(yīng)速度。
如何讓ELISA試劑盒系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中更穩(wěn)定的方法
檢測系統(tǒng)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研出產(chǎn)中zui為敏捷的技術(shù)手段。自己也為此苦惱過很長一段時(shí)間，跟著自己技術(shù)水平得進(jìn)步，或多或少地也把握了ELISA體系的脾氣，也是熟能生巧吧，現(xiàn)在做方陣，做ELISA已是輕車熟路了，以前檢測一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的，現(xiàn)在給我十個(gè)八個(gè)的從包被到顯色，一個(gè)工作日基本搞定。可是在新老手操縱過程中老是會泛起或大或小的題目，本人在剛開始做ELISA時(shí)就面對良多災(zāi)題，固然有師兄師姐鋪路，但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣，好比說花板，假陽性，全顯色，全部顯色，顯色比空缺還低。