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血磷濃度檢測試劑盒說明書

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磷濃度檢測試劑盒說明書

量法

意:正式測定之前選擇2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

格:100T/96S

定意義:

磷主要指血中的無機磷, 以無機磷鹽的形式存在。血漿中鈣、磷濃度關系密切,在以 mg/dL 示時,二的乘積(  [Ca×  [P)為 30~40 。當(  [Ca×  [P)>40 ,則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨 織;若(  [Ca×  [P)<35 則妨礙骨的鈣化,甚至可使骨鹽溶解,影響成骨作用。血鈣和血磷含量 的相穩定依賴于鈣、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對平衡。上述平衡受到維生素 D 旁腺素和降鈣素等激素的調節。

定原理:

除血清中有機磷后,無機磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸,被硫酸亞鐵還原后呈藍色,在620nm 光吸收;通過測定620nm吸光度,計算血液中磷含量。

自備儀器和用品

心機、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。 劑組成和配置:

劑一:液體×1 瓶,4℃保存。

劑二:液體×1 瓶,4℃保存。

試劑三:×1 瓶,4℃保存。  臨用前配制,依次加入11mL蒸餾水充分溶解,再加入試劑二,充

混合。

標準液:液體×1 支,1mmol/L無機磷,4℃保存。

血磷濃度測定操作

1. 光度計/酶標儀預熱30min 以上,調節波長到620nm ,蒸餾水調零。

2取出標準液,室溫解凍。

3. 血清預處理: 吸取50μL血清,加950μL試劑一,混勻后室溫8000rpm ,離心10min ,取上清液,待 

4. 空白管:取微量石英比色皿/96孔板,依次加入50μL蒸餾水,50μL試劑一,100μL試劑 ,混勻后靜置10min ,于620nm測定吸光度,記為A空白管。

5. 標準管:取微量石英比色皿/96孔板,依次加入50μL標準液,50μL試劑一,100μL試劑 ,混勻后靜置10min ,于620nm測定吸光度,記為A標準管。

6. 測定管:取微量石英比色皿/96孔板,依次加入50μL上清液,50μL試劑一,100μL試劑

,混勻后靜置10min ,于620nm測定吸光度,記為A測定管。

注意:空白管和標準管只需測定一次。

磷濃度計算:

含量 ( mmol/dL=[C 標準液×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)]× 樣品稀釋倍數 ×V =2×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)

C 準液:mmol/L;樣品稀釋倍數:  (50μL血清+950μL試劑一) ÷50μL血清=20

意事項:

1 、 試劑三需臨用前配制,如未用完,4℃保存,最多可使用3天;

品僅供科學研究使用!請勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途


、 定過程中,應盡量避免溶血,因為紅細胞中有機磷酯進入血清后可被酶水解而使得血 清無機磷含量增高

、 最低檢出0. 1mmol/L

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