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土壤中性*白酶活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC0275
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取1瓶加入6 mL試劑一，沸水浴攪拌溶解后待用，用不完的試劑可以2-8℃保存4周；

2. 標準液：20 μmol/mL 酪*酸溶液。

產品說明：

土壤*白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化，其水解產物是高等植物的氮源之一。土壤中性*白酶在中性環境下催化蛋白質水解，與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。中性條件下，土壤中性*白酶可將酪蛋白水解產生酪*酸；在堿性條件下，酪*酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍，在680nm有特征吸收峰。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器及用品：
可見分光光度計/酶標儀、可調式移液槍、臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養箱、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水、研缽、30-50目篩。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
當吸光值大于1.5時，建議將上清液用蒸餾水稀釋后進行測定，計算時注意乘以稀釋倍數。
實驗實例：

1. 分別稱取2份0.05g森林土樣于1.5mLEP管中，分別為對照管及測定管，按照測定步驟操作，使用96孔板測定吸光度，計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.582-0.355=0.227，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.374-0.045=0.329，按土壤質量計算酶活得：

土壤中性*白酶活性(U/g 土樣)=0.05×ΔA測定÷ΔA標準÷W=0.05×0.227÷0.329÷0.05=0.69 U/g 土樣。

1. 分別稱取2份0.05g三葉草土于1.5mLEP管中，分別為對照管及測定管，按照測定步驟操作，使用96孔板測定吸光度，計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.23-0.177=0.053，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.374-0.045=0.329，按土壤質量計算酶活得：

土壤中性*白酶活性(U/g 土樣)=0.05×ΔA測定÷ΔA標準÷W=0.05×0.053÷0.329÷0.05=0.1611 U/g 土樣。
相關發表文獻：
[1]Manyun Zhang, Jun Wang, Shahla Hosseini Bai, et al. Evaluating the effects of phytoremediation with biochar
additions on soil nitrogen mineralization enzymes and fungi. Environmental Science and Pollution Research. May 2018;(IF2.914)



[2]Zhang M, Wang W, Wang J, et al. Dynamics of biochemical properties associated with soil nitrogen mineralization following nitrification inhibitor and fungicide applications[J]. Environmental Science and Pollution Research, 2017, 24(12): 11340-11348..
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