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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC2575-100T/48Sα-半乳糖苷酶活性檢測試劑盒 微量法

α-半乳糖苷酶活性檢測試劑盒 微量法
  • α-半乳糖苷酶活性檢測試劑盒 微量法
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 BC2575-100T/48S
  • 廠商性質 生產商
  • 產品資料 查看pdf文檔
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時間:2024-04-11 11:13:59瀏覽次數:642評價

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CAS 詳詢 純度 詳詢
分子量 詳詢 分子式 詳詢
供貨周期 現貨 規格 100T/48S
貨號 BC2575 應用領域 環保,化工,生物產業,農林牧漁,綜合
主要用途 測定意義:α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動物、植物、微生物和培
儲存條件
-20℃
中文名稱
α-半乳糖苷酶活性檢測試劑盒 微量法
有效期
6個月
單位

英文名稱
α-galactosidase(α-GAL) Activity Assay Kit
別名
α-半乳糖苷酶試劑盒 α-GAL Kit α-半乳糖苷酶(α-GAL)試劑盒 α-半乳糖苷酶(α-GAL)測試盒
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reade


α-半乳糖苷酶(α-GAL)活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意:本產品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC2575
規格:100T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱規格保存條件
提取液液體100 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一粉劑×2-20℃保存
試劑二液體4 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體15 mL×1瓶2-8℃保存
標準品液體1 mL×1支2-8℃保存
溶液的配制:
1、試劑一:臨用前取1支加入1.25 mL蒸餾水,充分溶解備用;用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復凍融(1瓶粉劑溶解后可做100T,為了延長使用時間,此產品多給1瓶粉劑);
2、標準品:5 μmol/mL的對硝基 苯*溶液。
產品說明:
α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,能專一地催化α-半乳糖苷鍵的水解,主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對于植物種子的萌發至關重要,種子萌發初期,其催化產生的D-半乳糖通過糖酵解途徑迅速轉化和消耗,為種子的萌發提供最初的能量來源,后期則主要參與細胞壁儲藏多糖水解。
α-GAL分解對-硝基 苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基 苯*,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-GAL活性。

注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養箱、可調式移液器、超聲破碎儀、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
1細菌或培養細胞的處理:收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),15000g,4℃,離心20min,取上清,置冰上待測。
2、組織的處理:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿;15000g,4℃,離心20min,取上清,置冰上待測。
 
  • 測定步驟

  1. 分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至400nm,分光光度計蒸餾水調零。

  2. 標準液的稀釋:將標準液用蒸餾水稀釋至200、100、5025、12.5、6.25、0nmol/mL標準溶液待測

  3. 標準液稀釋可參考下表:

序號稀釋前濃度(nmol/mL)標準液體積(µL)蒸餾水體積(µL)稀釋后濃度(nmol/mL)
15000801920200
220010001000100
31001000100050
4501000100025
5251000100012.5
612.5100010006.25
76.25010000(空白管)
備注:實驗中每個標準管需70µL標準溶液。
  1. 樣本測定(在EP管或96孔板中依次加入下列試劑):

試劑名稱(μL測定管對照管標準管
試劑一25--
蒸餾水-25-
試劑二3535-
樣本 1010-
迅速混勻,放入37℃水浴鍋/恒溫培養箱中準確反應30min
標準品--70
試劑三130130130
充分混勻,室溫靜置2min后,于400nm處測定吸光值A,分別記為A測定管、A對照管、A標準管、A空白管。計算ΔA測定=A測定管-A對照管,ΔA標準=A標準管-A空白管。每個測定管需設一個對照管。標準曲線和空白管只需測1-2。

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