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ELISA試劑盒新手入門的使用說明技巧

閱讀:1369      發布時間:2015-4-30
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方法原理
  1.雙抗體()夾心法:檢測抗原()的常見方法,應用針對抗原兩個不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標抗體檢測溶液中的抗原(適用于二價以上抗原,不能測 小分子半抗原)。
  2.間接法:檢測抗體的方法,利用酶標記的抗抗體(第二抗體)檢測已與固相抗原結合的抗體。
  3.競爭法:檢測抗原或小分子半抗原、抗體,以測抗原為例,使待測抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合,結果如待測抗原含量越多,與固相抗體結合的酶標抗原就越少,顯色越淺,二者呈負相關。
◎操作注意
  使用干凈的塑料容器配置洗滌液,使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
  洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
  底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
ELISA試劑盒質控分析
  1.人員培訓內容包括:①檢驗項目的基本原理(ELISA試劑盒原理);②熟悉檢測技巧,了解易出差錯的環節及難點;熟悉檢測試劑性能(包括試劑盒組成,包被片段及其組成);③熟悉檢測儀器的原理及性能;掌握數據處理的能力和質量控制知識;④某些特殊項目的檢測如抗HIV等需經有關部門組織的專門培訓班,考試合格后持證上崗。
  2.基本了解
    1971Engvall等人把免疫組化的EIA技術應用于臨床檢驗發展為ELISA試劑盒技術。
    特點:ELISA試劑盒在固相表面組裝免疫活性物質形成"免疫吸附劑"
    酶標記免疫活性物質,進行信號放大;
    有二步溫育反應二次洗滌過程;
    靈敏度特異性相對較高。
    局限性:只能檢測到ng水平
    精密度差(批內CV15-20%);

 ATG16A  整合素αVβ1抗體
 ATG18/WIPI1  整合素αM/巨噬細胞表面分子抗體
 ATG3  整合素αL抗體
 ATG4A  整合素αE抗體
 ATG4C  整合素α7抗體
 ATG4D  整合素α6抗體
 ATG7  整合素α5抗體
 ATG8/GABARAPL2  整合素α4抗體
 ATG9A  整合素α4β7抗體
 ATG9B  整合素α3抗體
 ATGL/PEDFR  整合素α3β1抗體
 ATH III  整合素α2抗體
 ATM  整合素α1抗體
 ATP citrate lyase  整合素alpha E2 抗體
 ATP1b2/Na+K+ATPase  真核延伸因子激酶2抗體
 ATP2c1  真核啟動因子2α抗體
 ATP4B  真核翻譯延長因子2抗體
 ATP5J  真核翻譯起始因子4G抗體
 ATP7A  真核翻譯起始因子4E抗體
 ATP7B  真核翻譯起始因子4B抗體
 ATRN  真核翻譯起始因子3H抗體
 ATXN1  真核翻譯起始因子3F抗體
 AU1 tag  真核翻譯起始因子3A抗體
 AU5 tag  粘著斑激酶抗體
 Aurora A/ARK-1  粘膜血管定居因子抗體
 Aurora A/B/C  粘膜相關上皮趨化因子28抗體
 Aurora B/STK-1  粘附相關激酶抗體
 Aurora C  粘附分子相關蛋白a1抗體
 AVEN  粘蛋白-5B抗體
 AVPR2  粘蛋白-4抗體
 Axin1  粘蛋白-3抗體
 AXL  粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體
 B7-1/CD80  粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體
 B7-DC/CD273  增殖細胞核抗原抗體
 B7-H1/CD274  增殖細胞核抗原抗體
 B7H4  增殖細胞核抗原抗體
 BAAT  增殖細胞核抗原抗體
ELISA試劑盒 BACE1/ASP2  增殖潛能相關蛋白抗體
 BACH1/BRIP1  增食欲素-A/欲激素A
 Bad  增生肉蛋白1抗體
 Bad  造血細胞磷酸酶抗體
 BADH2  造血細胞激酶抗體


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