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技術文章

補體遺傳多態性的檢測

閱讀:979          發布時間:2012-2-25

補體遺傳多態性的檢測大多分二步進行,*步是用瓊脂糖高壓電泳或聚丙烯酰胺等電聚焦電泳將EDTA抗凝血漿通過凝膠電泳,根據分子量的大小、所帶電荷的多少及等電點(p1)將血漿蛋白分開。第二步是免疫固定或溶血鑒定,瓊脂糖高壓電泳或聚丙烯酰胺等電聚焦后,在凝膠板上鋪上抗補體某一成分的抗血清,使其與凝膠板上的抗原結合,形成分子量較大的免疫復合物沉淀嵌在凝膠孔中,不易漂洗掉,故稱免疫固定。將免疫固定后的凝膠板在生理鹽水中漂洗,除去其他蛋白成分??靖?,考馬斯亮藍染色。

依照第六屆補體定型會議標準或標準品,判斷待測樣本補體的同種異型?;蛴萌苎▽⒅旅鬝RBC和缺乏某一補體成分的豚鼠血清或人血清混合,傾倒在電泳完畢的凝膠板上,凝膠板上的待測補體成分使缺乏的補體成分得以補償,酶反應發生,導致溶血反應,凝膠板上可出現待測樣本補體某一成分的溶血帶。

補體C4有兩個基因座位,分別為C4A、C4B,兩者均表現高度的遺傳多態性,現已發現30余種同種異型。C4遺傳多態性在人類淵源、法醫鑒定及與疾病相關的研究領域受到極大的重視。C4遺傳多態性的檢測方法可分兩種,一種是瓊脂糖高壓電泳加免疫固定,另一種是瓊脂糖高壓電泳后加溶血覆蓋。在有抗血清的情況下,使用前者簡單、方便、易行。僅在C4兩個基因座位不易辨別時才采用后者。

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