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技術文章

炭疽免疫電化學發光技術

閱讀:535          發布時間:2011-7-6

化學發光指在氧化過程中,有一中間產物或終末產物,因能吸收能量而處于激發狀態,并以化學發光的形式放出能量。化學發光免疫分析的基本原理是將發光劑的衍生物加到免疫反應體系中,取代放射性同位素、酶、熒光等標記物,zui后通過某種儀器測量反應過程中產生光子的多寡,從而推算被測物質的量。

ECL一般采用Ru(bpy)2+3、TPA作為氧化還原劑。加強的免疫電化學發光技術(1ECL)用于細菌的檢測。與常規夾心免疫方法不同的是,該法采用直接的夾心免疫;與常規化學發光及熒光技術相比,其主要優點是信噪比高,發光信號易控制。典型的ECL反應中,甚至在生物樣品存在時,因無熒光激活過程也沒有熒光干擾,且電動勢易控制相關ECL光子強度,與反應時間和探針濃度無關。但也存在順磁珠非特異性吸附及某些化學物質干擾化學反應造成假陽性的現象。

Gatto Menking等報道用ECL檢測炭疽芽孢桿菌,敏感性達100個/ml;IECL具有高度重現性,對液相中可溶性抗原、核酸有檢測能力。但其影響因素多,且還有好多影響因素目前尚不清楚i抗體的生物素化、磁珠的選擇使得非特異結合降低。改進的IECI。與常規IECL相比,敏感性增加了10倍。加強的IECL采用直接夾心免疫法檢測,選用一種親和力常數zui高的抗體進行*免疫反應,敏感性達10個/ml。

 

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