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上海源葉生物科技有限公司>技術文章>細胞免疫染色復染

技術文章

細胞免疫染色復染

閱讀:858          發布時間:2011-3-24
 
    復染常有助于在細胞免疫染色中鑒別不同的細胞類型,或者亞細胞結構。這對組織切片來說是基本步驟,并可鑒定細胞的類型。也可用于其他染色反應。復染不能使用熒光染料,因其復染后可產生自發熒光。為了選擇一種適宜的復染方法,首先應檢測細胞染色試劑是否在乙醇中可溶。
 
    1.不溶于乙醇的方法
    (1)用水輕輕洗滌標本片;
    (2)加數滴Harris蘇木精(商品化試劑)于標本中,孵育約5min。染色時間的長短決定染色的強度;
    (3)用水輕輕洗滌;
    (4)用0.5%冰乙酸/99.5%乙醇處理標本片大約10rain;
    (5)用水輕輕洗滌;
    (6)用DPX封片。
 
    2.溶于乙醇的方法
    (1)用水輕輕洗滌標本片;
    (2)加數滴Mayer蘇木精(商品化試劑)至標本片,孵育大約5min,染色時間的長短決定染色的強度;
    (3)用水輕輕洗滌;
    (4)用30mm01/L氫氧化銨重復處理標本片
    (5)用水輕輕洗滌;
    (6)用Gelvat01或MOWi。1封片。

復染
推薦用法
需準備試齊
優    點
缺    點
蘇木精
可用于黑色或棕色染料;用于核或細胞質抗原染色
可購買
可保存的信息量大;核大
染色很暗,不適合弱抗原信號的顯示
甲基綠
可用黑色或棕色染色,用于核抗原染色
貯存液二1%甲基綠溶于100mmol/L    酸鈉(pH5.5);工作液為0.1%
染色淺,適用于弱抗原信號,胞質大
獲得的組織或細胞精細資料有限
堅固紅
用于藍色染色或LacZ檢測,可用于核或細胞質抗原染色
可購買
 
著色很淺,獲得的組織或細胞精細資料有限

 

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