化工儀器網
技術文章
液相色譜法測定氯霉素CAP殘留
閱讀：632 發布時間：2010-11-13（1）試劑和材料 除另有規定外所有試劑均為分析純，水為蒸餾水或相當的去離子水。
①乙酸乙酯：分析純
②甲醇：紫外光譜級
⑧正己烷：分析純
④高氯酸：分析純，o．5mol幾
⑤氯霉素標準品：含量≥99％
⑥氯霉素標準溶液：準確稱取適量的氯霉素標準晶，用甲醇配成o．10mg／m1的標準貯備液，根據需要吸取適量貯備液，將甲醇吹去后用o．5mol／L高氯酸溶液配制成癥當濃度的標準工作液。
（2）儀器和設備
①液相色譜儀：配有紫外線檢測器
②均質器：10000r／mln
③離心機：3000r／Hill）．
④微量注射器：25,~L、i00~L
（3）測定步驟
①提取與凈化 稱取5。0s均勻試樣（至o．1g）于50ral離心管中，加入lOml乙酸乙酯，稱量后在均質器中快速均質lmin，離心3min。再稱量，補人損失的乙酸乙酯。移取5．Oral乙酸乙酯提取液，置于帶塞尖底離心管中，在45~C水浴中用氮氣吹去乙酸乙酯。殘留物用o．5ml高氯酸溶液溶解，稱量后，加入lml正己烷，振蕩lmin，靜置分層后用吸管吸棄正己烷層。再重復處理3次。用氮氣吹去殘余的正己烷，稱量，加入高氯酸溶液，以補入損失量。經o．45／zm濾膜過濾后，供測定用。
②測定
a.色譜條件
色譜柱：uBondapakCy
波長：280nm
流動相：甲醇—水混合液（35+65）
流速：lml／mia
色譜柱溫度：40~C
b．色譜測定 根據樣液中氯霉素含量情況，選定峰面積相近的標準工作溶液。標準工作溶液和樣液中氯霉素響應值均應在儀器檢測線性范圍內。對標準工作溶液和樣液等體積參插進樣測定，在上述色譜條件下，氯霉素保留時間約為7．2rain。
（4）空白試驗 除不加試樣外，按上述測定步驟進行。
（5）計算 用色譜數據處理機或按下列公式計算試樣中氯霉素殘留量：
X=Acs/Asc
X--試樣中氯霉素殘留量，mg／kg；
A--樣液中氯霉素的峰面積；
As--標準工作溶液中氯霉素的峰面積；
Cs--標準工作溶液中氯霉素的濃度，Ps／ml
c--zui終樣液所代表的試樣濃度，8／ml。
注：計算結果需扣除空白值。
（6）檢測限和回收率
本方法的檢測限為o．01mg／kg。
在0．010～1 00mg／kg添加濃度水平上，回收率范圍為87.2％一98.3％。