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酶試劑與儀器配套使用的方法

閱讀:2392        發布時間:2012-1-11

一、檢測前的準備:

1、開啟儀器:
1)將電源適配器插入220v電源插座,將適配器DC插口插入儀器的電源接口接通儀器電源。
2)按“開關”鍵開啟儀器。儀器顯示自檢界面。此時注意樣品室內不能有樣品放入,樣品室門蓋應蓋住以保證樣品室的光強正常并且無其他雜散光。
3)如果儀器自檢不通過,儀器自動顯示自檢不通過信息;儀器自檢通過后,自動進入選擇檢測項目界面。
[備注]:儀器進入選擇檢測項目界面后,建議用戶將儀器預熱10分鐘,以確保光源穩定后再開始測量。
2、選定檢測項目—“農藥殘留”
1)在待機檢測狀態下,儀器顯示“檢測項目”界面,按“▲”和“▼”鍵選定檢測項目—“農藥殘留”;2)按“確認”鍵進入“農藥殘留”的待測界面。
3、設置檢測編號:
1)將儀器光標移向“設置編號”。此時按下“確認”鍵,儀器顯示編號設置界面。
2)按“▲”和“▼”鍵選定編號。
3)選定編號并確認編號無誤后,按下“確認”鍵。
4、設定的顯色時間:
1)將儀器光標移向“顯色時間”。此時按下“確認”鍵,儀器顯示顯色時間界面。
2)按“▲”和“▼”鍵選定顯色時間一分鐘或三分鐘,按下“確認”鍵,顯色時間設置完成。

二、檢測試劑(酶試劑)制備:

1、緩沖液:將緩沖液試劑袋中的試劑倒出,溶于500ml 蒸餾水中,溶解、混勻即可。
2、底物;向標有“底物”的試劑瓶中加入2.7 ml 蒸餾水,溶解、混勻即可。0~5ºC環境下冷藏保存。
3、顯色劑:按試劑瓶上的標簽說明,向標有“顯色劑”的試劑瓶中加入26 ml 緩沖液,溶解、混勻即可。
4、酶試劑:酶試劑已配成溶液可直接使用。平常要在0~5ºC環境條件下冷藏保存,切勿冷凍結冰!!!
[備注]“酶試劑使用前請搖晃均勻。使用時用一瓶取一瓶,用完再取用新的,要防止其它物質的污染,以免溶液中失效,未用完的試劑可放在清洗干凈的反應瓶中0~5ºC環境條件下保存。反應瓶建議用去污粉清洗,盡可能不用洗潔清洗。(去污粉可在一般的日雜商站或化學試劑商店買到。)
5、試劑使用過程中防止污染應遵循的原則:
(1)器具原則:所有用于轉移試劑或樣品的器具都要并帖上標記,以免混用而造成交叉污染。
(2)試劑“只出不進”原則:每次測試時,從試劑瓶中吸出(抽取)的試劑不管是否使用,只要吸出來了,即便用不上或用不了造成浪費也不要打回去。否則,容易污染整瓶試劑造成更大損失,甚影響以后所有的測試,產生錯誤的測試數據。

三、 樣品前處理及對照樣品、檢測樣品的制備:

1、 對照樣品的制備:
取酶100ul,緩沖液2.5ml,加入反應瓶中,混勻,再加入顯色劑100ul,底物20ul。搖勻后立即轉移到比色皿中,放入儀器進行對照測試。
2、 檢測樣品的制備:
(1)取2g果蔬樣品(葉菜剪成1厘米見方的小片,瓜果取1厘米見方的橫截面)放入三角瓶中,加入10ml緩沖液, 振蕩提取2分鐘后過濾,取出清液即為待測試液。
(2)取酶100ul,待測試液2.5ml,加入反應瓶中,混勻靜置抑制10分鐘后,(按儀器顯示的時間計時)加入顯色劑 100ul,底物 20ul 。搖勻后立即轉移到比色皿中

四、空白對照測量:

*步:按下“100%”鍵;
第二步:打開儀器門蓋,將裝有對照液的比色皿放入的通道中,蓋好儀器門蓋,按下“對照”鍵,屏幕左下角顯示測量時間;
第三步:空白對照檢測結束后,儀器自動顯示空白樣品對照測試結果Ao,打開儀器門蓋,取出對照。
[備注]:
(1)當空白對照值在0.15-0.3之間時,可繼續做實驗;
(2)當空白對照值在<0.15時,要重新做空白對照,若連續做的空白對照值在<0.15時,必須更換酶試劑。
(3)當空白對照值在>0.3時,要調試減少儀器的測量時間,重新做空白對照。

五、 樣品測量:

*步:按下“100%”鍵;
第二步:打開儀器門蓋,將裝有樣品液的比色皿放入的通道中,蓋好儀器門蓋,按下“樣品”鍵;
第三步:檢測結束后,儀器自動顯示通道農藥殘留檢測樣品的檢測結果Ai,儀器自動保存對照值和檢測結果,打開儀器門蓋,取出樣品。
[備注]:樣品的抑制率在40~50%之間為可疑農殘超標樣品,抑制率大于50%為農殘超標樣品,表明被測樣品的農藥殘留性可能超過安全的界定標準,建議用氣相色譜等儀器分析法作進一步的確認。

六、檢測結果打印:

在顯示農藥殘留檢測結果界面,按 “打印”鍵,儀器開始打印。

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