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深圳市科潤達生物工程有限公司
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兒茶酚胺檢測試劑盒操作流程是怎樣的?

時間:2021/5/25閱讀:893
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   兒茶酚胺檢測試劑盒是重點實驗室為科研研究的*品5-羥色胺ELISA檢測試劑盒,在生物分子領域得到長足的發展及火爆的人氣。兒茶酚胺檢測試劑盒可以根據實驗的需求與目的來計算曲線,每次實驗的標準曲線一般設7個不同濃度,加上空白孔,標準曲線一共需要8個孔。因此,一個48T試劑盒最多可以測定40個樣本(不做重復且一次用完),一個96T試劑盒最多可以測定88個樣本(不做重復且一次用完)。
  操作流程如下:
  1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
  2酶標板置4℃,包被過夜。
  3洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后,即甩去,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
  4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
  5酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
  6洗板,同4。
  7每孔加1:5000稀釋的hrp-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
  8酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
  9洗板,同4。
  10每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
  11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應。
  12分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測得的od值為兩者之差w1-w2,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
  13數據處理:在得出標本s和陰性對照n的 od值后,計算s/n值。s/n***2.1為陽性判定標準。

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