抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）測定

    血管炎系指以血管壁（主要是動脈）發炎和壞死為基本病理所引起的一組疾病。

    近年來認識到抗中性粒細胞胞漿抗體（anti-neutrophil cytoplasmic antibody，ANCA）是存在于血管炎患者血清中的自身抗體，是診斷血管炎的一種特異性指標。采用間接免疫熒光法（1f了），可將ANCA分為胞漿型（C-ANCA）、核周型（P-ANCA）和不典型ANCA（X-ANCA）。

    C—ANCA的靶抗原是髓過氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）、彈性蛋白酶（elastase）、組織蛋白酶C（cathepsin G）、溶菌酶、乳肝褐素（1actoferrin），在所有ANCA陽性血清中約占40％。X-AN-CA或P-ANCA的靶抗原是乳肝褐素、溶菌酶、β葡萄糖苷酸酶（β-glucoronidase）、組織蛋白酶G。

    ANCA的檢測方法有許多種，包括IFF、RIA、ELISA、Western印跡法、斑點印跡法及免疫沉淀試驗等。方法為IFF，至今仍作為ANCA篩檢的“金指標”。在用IFF法檢測ACNA的同時進行ELISA的檢測將有助于疾病的動態觀察；靶抗原PR3或MPO的分辨將有助于某些特發性壞死性血管炎或壞死性腎小球腎炎的確診。Gross等（1993）作了ANCA和有關疾病的分析。陳素英等（1996）以IFF法檢測ANCA并對其與170例疾病的相關性作了報道。現介紹IFF檢測ANCA。

    1．操作步驟

    （1）用肝素抗凝血分離白細胞，以0．01mol／L，pH7．4PBS液洗滌，制成細胞基質片，用95％乙醇固定5min。

    （2）將1：20稀釋的血清標本滴加于底物片上，濕盒內37~C孵育30min。

    （3）再將基質片分為三組，分別滴加1：10稀釋的FITC-羊抗人IgG、IgA和IgM，37~C孵育30min，洗滌3次。

    （4）加2：1緩沖甘油封片，置熒光顯微鏡下觀察。

    2．結果觀察  C-ANCA：熒光將胞漿勾劃出清晰分葉核輪廓；P-ANCA：熒光集中核周圍形成環狀，或不規則塊狀；X-ANCA：表現為彌漫的胞漿熒光。

    3．注意事項  由于乙醇固定的基質片上抗核抗體（ANA）陽性血清易表現為P-ANCA假陽性，因此應采用多聚甲醛固定以分辨是否ANA與ANCA共存。

    4．臨床意義  C-ANCA是診斷多發性肉芽腫（Weaner’s granulomatosis，WG）非常敏感的指標，也少見于微小多動脈炎（microscopic polyarteritis，MPA），Churg-Strauss綜合征、經典的結節性多發性動脈炎。P-ANCA見于腎性血管炎，急性進行性腎小球腎炎（rapidly pro-Gressive lomemlonephritis，PRGN），風濕性和膠原性血管疾病。X-ANCA或P-ANCA見于潰瘍性結腸炎，自身免疫性肝炎，原發性硬化膽管炎。

    陳素英等檢測的結果指出，ANCA在風濕病患者血清中陽性率為70．0％，與ANA和抗組蛋白（histone）有交叉重疊現象。在風濕病患者中，ANCA不僅存在于SLE中，類風濕性關節炎及皮肌炎患者的血清也可出現ANCA陽性。在腎臟疾病中，ANCA陽性率為72．85％，其分布較廣泛，多見于新月體腎小球腎炎、紫癜性腎炎、IsA腎病和局灶節段性腎小球硬化，但也可見于微小病變性腎病、急性間質腎炎、腎小球終末期病變等疾病中。

因此，不能以ANCA陽性而確診為局限于腎臟MPA或壞死性腎小球腎炎，腎組織學檢查仍*。

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