液相色譜

時間：2012/11/24閱讀：2738

液相色譜
液相色譜也叫層析法，它是一種能的物理分離技術，將它用于分析化學并配合適當的檢測手段，就成為色譜分析法。
液相色譜的zui早應用是用于分離植物色素，其方法是這樣的：在一玻璃管中放入碳酸鈣，將含有植物色素（植物葉的提取液）的石油醚倒入管中。此時，玻璃管的上端立即出現幾種顏色的混合譜帶。然后用純石油醚沖洗，隨著石油醚的加入，譜帶不斷地向下移動，并逐漸分開成幾個不同顏色的譜帶，繼續沖洗就可分別接得各種顏色的色素，并可分別進行鑒定。色譜法也由此而得名。　　現在的色譜法早已不局限于色素的分離，其方法也早已得到了極大的發展，但其分離的原理仍然是一樣的。我們仍然叫它色譜分析。　　一、色譜分離基本原理：　　由以上方法可知，在色譜法中存在兩相，一相是固定不動的，我們把它叫做固定相；另一相則不斷流過固定相，我們把它叫做流動相。　　色譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質在兩相中的分配系數、吸附能力等親和能力的不同來進行分離的。　　使用外力使含有樣品的流動相（氣體、液體）通過一固定于柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面。當流動相中攜帶的混合物流經固定相時，混合物中的各組分與固定相發生相互作用。　　由于混合物中各組分在性質和結構上的差異，與固定相之間產生的作用力的大小、強弱不同，隨著流動相的移動，混合物在兩相間經過反復多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時間不同，從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當的柱后檢測方法結合，實現混合物中各組分的分離與檢測。　　二、色譜分類方法：　　色譜分析法有很多種類，從不同的角度出發可以有不同的分類方法。　　從兩相的狀態分類：　　色譜法中，流動相可以是氣體，也可以是液體，由此可分為氣相色譜法（GC）和法（LC）。固定相既可以是固體，也可以是涂在固體上的液體，由此又可將氣相色譜法和法分為氣-液色譜、氣-固色譜、液-固色譜、液-液色譜。　　法是繼氣相色譜之后，70年代初期發展起來的一種以液體做流動相的新色譜技術。　　是在氣相色譜和經典色譜的基礎上發展起來的。現代和經典沒有本質的區別。不同點僅僅是現代比經典有較高的效率和實現了自動化操作。經典的法，流動相在常壓下輸送，所用的固定相柱效低，分析周期長。而現代法引用了氣相色譜的理論，流動相改為高壓輸送（zui高輸送壓力可達4.9?107Pa）;色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經典（每米塔板數可達幾萬或幾十萬）；同時柱后連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進行連續檢測。因此，具有分析速度快、分離效能高、自動化等特點。所以人們稱它為高壓、高速、或現代法。

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