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技術(shù)文章

Accucore液相色譜柱的安裝有什么技巧嗎?

點擊次數(shù):2331 發(fā)布時間:2016-5-26

  
  
  Accucore液相色譜柱安裝技巧不多,只要接頭和柱頭匹配,確實擰緊不漏就可以了,但也要注意不要擰得太緊以至于損傷螺紋。
  
  所謂死體積就是*不保留的物質(zhì)出峰時從進樣到流過色譜柱的總體積,一般用極性非常強的尿嘧啶的出峰來測定。死體積包括柱體積(色譜柱內(nèi)溶劑能占據(jù)的空腔體積)和柱外體積兩部分。你從廠商這里買到色譜柱,柱體積已經(jīng)是固定了,你能盡量避免減少的是柱外體積。進樣器內(nèi)死體積、毛細管長度、毛細管和色譜柱連接緊湊與否,保護柱或在線濾器產(chǎn)生的死體積大小,都對這個有影響。樣品在柱內(nèi),除擴散外,還有和填料作用引起的組分分離;但樣品在柱外,那就只有擴散這個使柱效下降的因素了。所以,要取得好的分離效率,柱外體積應(yīng)該是越小越好。
  
  Accucore液相色譜柱峰有時候前延,有時候拖尾,一般不是色譜柱的問題,應(yīng)該是樣品和色譜柱填料的作用問題,可以說如果色譜柱類型選擇沒問題,關(guān)鍵就是色譜條件的選擇。包括進樣量、樣品溶劑、流動相組成(包括添加劑)、流動相pH以及柱溫,都對峰形有影響。另外測定分子量較大的多肽,用樣品老化平衡色譜柱很重要,分子量越大的物質(zhì),需要平衡時間越長。如果柱子沒平衡好,峰形也可能會不正常。所以把你具體的測定條件也列一下,也便于有針對性的分析原因。

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