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核酸污染- 分子診斷行業(yè)中不能忽視

2015-12-2  閱讀(1077)

分子診斷,核酸污染,DNARNAPCRDNA測序,原位雜交,SNP,基因芯片,核酸污染預(yù)防,核酸污染清除,假陽性,DNase,核酸污染清除試劑,分子生物

 

分子診斷是指利用分子生物學(xué)方法來檢測樣品中遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的變化從而做出相應(yīng)診斷的技術(shù)。由于分子生物技術(shù)的發(fā)展,人們生活水平不斷提高記憶對健康問題更為重視,分子診斷得以迅猛發(fā)展,*快速提高。我國分子診斷產(chǎn)業(yè)雖然起步較晚,但現(xiàn)已與歐美,日本,新加坡等起步較早的國家之間的的差距也越來越小。

分子診斷所應(yīng)用到的分子生物學(xué)技術(shù)主要包括,聚合鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR),熒光定量PCRqPCR),DNA測序(DNA Sequencing),熒光原位雜交(FISH),DNA印記技術(shù)(DNA Blotting),單核酸多態(tài)性(SNP)和基因芯片(Gene Chip)等技術(shù)。這些技術(shù)的操作都離不開一個(gè)重要的物質(zhì)核酸(DNARNA)。而由于日常檢測中要處理大量的不同來源的核酸以及核酸本身難以降解的特性,核酸污染是困擾絕大多實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)難題。微量的核酸污染會(huì)產(chǎn)生假陽性的檢測結(jié)果,這樣會(huì)對病人造成誤診,耽誤病情。如任由此情況發(fā)展,會(huì)形成氣溶膠污染而擴(kuò)散,zui終導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的污染,嚴(yán)重的會(huì)關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室,如無備用實(shí)驗(yàn)室,會(huì)造成更大的損失。

在與核酸污染長期抗?fàn)幹校藗円部偨Y(jié)出了一些預(yù)防和清除核酸污染的方法。對于預(yù)防,實(shí)驗(yàn)人員一定要不斷改進(jìn)并嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)室操作流程,對實(shí)驗(yàn)室不同操作進(jìn)行區(qū)域劃分,分裝試劑,定期對實(shí)驗(yàn)儀器進(jìn)行滅菌,實(shí)驗(yàn)室適當(dāng)通風(fēng),養(yǎng)成實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行陰陽對照的好習(xí)慣。當(dāng)污染已經(jīng)出現(xiàn),傳統(tǒng)的清除方法包括對可疑器用稀酸進(jìn)行擦拭或浸泡,紫外線照射,對反應(yīng)液用DNaseⅠ或內(nèi)切酶進(jìn)行處理等方法。這些方法對一些微量污染會(huì)有一定效果,但對污染效果不是很理想,而且紫外線照射會(huì)對人體造成一定的危害。近些年來,一些生物試劑公司專門開發(fā)研制出一些檢測清除核酸污染的試劑,這些試劑具有對人體無害,操作簡單,省時(shí)等特點(diǎn),其中一些試劑只需噴灑在污染去經(jīng)過一段時(shí)間的反應(yīng),擦除后便可清除污染。但這些產(chǎn)品還是相對傳統(tǒng)方法花費(fèi)略高。

總之,對于核酸污染大家一定要給予足夠的重視,提前預(yù)防,不要等到污染已經(jīng)出現(xiàn)才想辦法清除,經(jīng)常在實(shí)驗(yàn)室中配備清除污染的試劑,發(fā)現(xiàn)污染可馬上進(jìn)行處理,相信這樣核酸污染將不再是讓眾多實(shí)驗(yàn)人員頭疼的問題。



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