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多聚螯合物酶法--通用免疫酶復合物 (UIP)法

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多聚螯合物酶法--通用免疫酶復合物 (UIP)法

長期以來,許多的研究者希望IHC方法更敏感、更穩定、更簡單,要求多步檢測系統簡化,但敏感性要進一步提高,使這一技術面臨巨大的挑戰。在實踐中,往往是步驟減少了,敏感性也降低,這是一對矛盾。為了克服這一矛盾,為此嘗試了許多辦法,如催化信號放大系統(CSA)、免疫PCR、末端產物放大技術等方法,其敏感性增加了,但伴隨而來的高非特異性背景染色使應用者難接受。

一種新的多聚螯合物酶二步法在1995年被隆重推出,該方法與簡單的二步法相比較,具有很高的敏感性、穩定性和特異性。目前,多聚螯合物酶法也稱非生物素檢測系統,有三種不同物質設計的多聚螯合物,它們是以碳為骨架(C—C—C—C—C—C—C一)的多聚螯合,主要構成EnVision法的EnVision試劑。它的主要缺點是不易折疊,相對分子質量大,形成空間障礙,使穿透細胞或核膜能力下降,影響到方法的敏感性,并常出現組織染色不均一。另一種是以多聚糖為骨架的多聚螯合物,主要用于PowerVision法,它可以折疊,使酶和抗體分子呈串珠樣緊密排列,其復合物顆粒小于EnVision試劑,其敏感性好于En—Vision法。第三種是以氨基酸類為骨架的多聚螯合物,主要用于UIP(universal immu—noperoxidasepolymer)法,其敏感性基本與PowerVision法相同。其缺點是多聚物中有N末端暴露,形成的電荷能和組織細胞發生靜電吸附,可造成非特異性染色,染色時需平衡靜電荷。

UIP(universalimmuno—enzymepolymer)法,即通用免疫酶復合物法,是Nkhirei發明的一種新型免疫組化染色方法。其基本原理及工作流程與EnVision法相似,不同的是UIP復合物為HRP—氨基酸—抗鼠或抗兔IgG復合物(N—Histofine復合物)。因N—Histofine復合物相對分子質量較EnVision復合物相對分子質量稍小,理論上具有更強的穿透力。
多聚螯合物酶法--通用免疫酶復合物 (UIP)法
 

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