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人胚胎生殖細胞體外培養條件的優化及細胞移植實驗的研究目的

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人胚胎生殖細胞體外培養條件的優化及細胞移植實驗的研究目

優化人胚胎生殖細胞(EG細胞)的體外培養體系,并將生長狀態良好的傳代的人EG細胞移植用于大鼠心肌梗死模型的 治療 ,探討人胚胎生殖細胞進行異種移植對大鼠心肌梗死的治療機制。方法:取5~10周人胚胎生殖腺嵴和背側腸系膜,用添加和不添加細胞因子的兩種培養體系對比進行組織塊原代及傳代培養,選取生長情況良好的傳至第4代的人EG細胞,移植到急性心肌梗死大鼠的梗死心肌周圍,分別于移植后1天、1、2、4周處死大鼠,以鼠抗人細胞核抗體MAB1281作為示蹤劑[1],通過免疫組化方法檢測移植細胞的分布。結果:在培養液中添加LIF和b-FGF后原代及傳代培養的人EG細胞生長旺盛,形成集落更早,傳到第4代形成的集落體積變化不大;移植組人EG細胞在移植后1天、1周、2周、4周均可以在心梗區域觀察到MAB1281陽性細胞。結論:添加LIF和b-FGF的培養體系是更的人EG細胞培養體系。人EG細胞可異種移植,人EG細胞在大鼠心肌梗死處由心外膜層逐漸向心肌層遷移。

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