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722次本試劑僅供研究使用 標本:血清
試驗原理:
AT-III試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知AT-III濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將AT-III和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,人抗凝血酶-ⅢELISA檢測試劑盒然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中AT-III的濃度呈比例關系。
洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
局限
6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。人抗凝血酶-ⅢELISA檢測試劑盒稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。
結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的AT-III標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的AT-III含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍:0-40IU/ml
4、敏感度: 0.1 IU/ml
RC073-5ug Recombinant Human I-TAC/CXCL11 (rHuI-TAC/CXCL11) 5ug
RC074-5ug Recombinant Human Fractalkine/CX3CL1 (rHuFractalkine/CX3CL1) 5ug
RC075-2ug Recombinant Human MCP-2/CCL8 (rHuMCP-2/CCL8) 2ug
RC076-5ug Recombinant Human MCP-4/CCL13 (rHuMCP-4/CCL13) 5ug
RC077-5ug Recombinant 人抗凝血酶-ⅢELISA檢測試劑盒Human MIP-5/CCL15 (rHuMIP-5/CCL15) 5ug
RC078-5ug Recombinant Human LEC/NCC-4 (CCL16) (rHu LEC/NCC-4/CCL16) 5ug
RC079-2ug Recombinant Human MIP-4/CCL18 (rHuMIP-4/CCL18) 2ug
RC080-5ug Recombinant Human MIP-3 alpha/CCL20 (rHuMIP-3a/CCL20) 5ug
RC081-2ug Recombinant Murine SDF-1 beta /CXCL12 (rMuCXCL12) 2ug
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