根據我公司進口ELISA試劑盒實驗技術部多年的經驗以及客戶們的咨詢問題總結，整理分析出了幾個需要嚴格注意的方面，實驗者們隨我公司來看一看吧（供參考）。
1. 采用手工洗板，孔與孔之間液體交叉：曾用洗瓶直接沖洗板。ELISA試劑盒后來雖然也用槍逐孔洗板，但對此注意不夠。
2. 加終止液時應避免產生氣泡：終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。
3. 讀板時板底不清潔：難免洗板后板底有水漬，這也可能導致讀數不準。
4. 加樣板過多、加樣速度慢，造成各孔反應時間不均一：但溫度高時，加樣時間過長將導致各孔時間的反應時間不均一；還使得孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。如果連續做好幾塊板，則有可能使某些板不能及時洗板，也導致孵育時間人為延長。
5. 溫育溫度的選擇
說明書表明的溫度可有兩種（①37℃下1小時、②43℃下45分鐘），從免疫測定的抗原抗體反應的本質來看，在較低的溫度下反應較長的時間zui為*。ELISA試劑盒我公司建議在臨床ELISA測定中盡量使用較低溫育溫度較長反應時間的條件。   
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