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研域講解之細胞的傳代

時間:2020/3/9閱讀:1615
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1. 貼壁細胞:

 

對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱.50ml培養瓶加入消化液約0.6ml,按此比例進行消化,(根據配制強度經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗.

 

2. 懸浮細胞:

 

一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離500rpm,5mi后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養.

 

細胞傳代培養注意事項:

 

1. 嚴格的無菌操作

 

2. 適度消化:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應該注意培養細胞形態的變化,一旦胞質回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化 。   
   
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