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ELISA試劑盒注意事項和具體操作過程

時間:2017/9/22閱讀:1496
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ELISA試劑盒注意事項
1. 取出板條前康復到室溫后再打開外包裝袋,試驗中不必的板條當即放回包裝中,密閉封口,其他不必試劑應蓋好。
2. 試驗操作中請運用一次性的吸頭,避免穿插污染。
3.試驗板孔參加試劑的順序應共同,以保證一切反響孔的孵育時間共同。
4.洗刷過程中反響孔中殘留的洗刷液應在濾紙上充沛拍干,勿將濾紙直接放入反響孔中吸水。
5.試劑盒內試劑請在保質期內運用,不同批號試劑不要混用。
6.1000pg/ml以上的成果為非線性的,根據此規范曲線無法得到準確的成果。大于1000pg/ml 的樣品應以規范稀釋緩沖液稀釋后重做。在成果剖析時,結合考慮相應的稀釋度。

 

ELISA試劑盒操作過程:關于elisa試劑盒的具體操作過程:
1.取出試劑盒室溫平衡30min,取出血樣放至室溫。
2.配規范品:取150uL規范品參加150uL規范品稀釋液稀釋,順次稀釋5次。
3.加樣:別離于各反響孔中參加規范品50uL,樣品40UL,規范品做復孔,樣品做3孔。
4.別離于樣品孔中參加10UL抗體。
5.規范品和樣品孔中別離參加50uL鏈酶親和素-HRP,蓋上封板膜,悄悄震動混勻,37℃溫育60min。
6.配洗刷液:將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
7.洗刷:當心揭開封板膜,棄去液體,甩干,每孔加200uL洗刷液,靜置30s后棄去,如此重復5次,拍干。
8.顯色:每孔先參加顯色劑A 50uL,再加顯色劑B 50uL,悄悄震動混勻,37℃避光顯色6min。
9. 停止:每孔參加停止液50uL,停止反響(此刻藍色當即轉為)。
10.測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度。測定應在加停止液10min之內進行。
11.保存成果,拾掇桌面。
12.剖析處理數據

 

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