高速逆流色譜儀具有的重現(xiàn)性

閱讀：2021發(fā)布時間：2017-6-20

高速逆流色譜儀具有的重現(xiàn)性

高速逆流色譜法 (High-speed Countercurrent Chromatography，簡稱HSCCC)，于1982年由美國國立衛(wèi)生院Ito博士研制開發(fā)的一種新型的、連續(xù)的液液分配色譜技術，與其它色譜技術不同的是它不需任何固態(tài)載體，因此能避免固相載體表面與樣品發(fā)生反應而導致樣品的污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響。同時它也具有適用范圍廣、快速、進樣量大、費用低、回收率高等優(yōu)點。因此，己在生物、醫(yī)藥、食品、材料、化妝品和環(huán)保等領域獲得了廣泛的應用，尤其是在天然產(chǎn)物活性成分的分離純化領域倍受重視。

高速逆流色譜法是建立在單向性流體動力平衡體系之上的一種逆流色譜分離方法，它是在研究旋轉管的流體動力平衡時偶然發(fā)現(xiàn)的。當螺旋管在慢速轉動時，螺旋管中的兩相都從一端分布到另一端。用某一相作移動相從一端向另一端洗脫時，另一相在螺旋管里的保留值大約50%，但這一保留量會隨著移動相流速的增大而減小，使分離效率降低。但使螺旋管的轉速加快時，兩相的分布發(fā)生變化。當轉速達到臨界范圍時，兩相就會沿螺旋管長度*分開，其中一相全部占據(jù)首端的一段，我們稱這一相為首端相，另一段全部占據(jù)尾端的一段，稱為尾端相。高速逆流色譜正是利用了兩相的這種單向性分布特征，在高的螺旋管轉動速下，如果從尾端送入首端相，它將穿過尾端相而移向首端，同樣，如果從首端相送入尾相，它將穿過首端相而移向螺旋管的尾端。分離時，在螺旋管內(nèi)首先注入其中的一相(固定相)，然后從合適的一端泵入移動相，讓它載著樣品在螺旋管中無限次的分配。儀器轉速越快，固定相保留越多，分離效果越好，且大大地提高了分離速度，故稱高速逆流色譜。

簡述高速逆流色譜儀的產(chǎn)品優(yōu)勢：

1、由于溶劑系統(tǒng)的組成及配比可以是無限多的，因而從理論上講可以適用于任何極性范圍內(nèi)樣品的分離，在分離天然化合物方面具有其獨到之處。由于聚四氟乙烯管中的固定相為液體不需要固相載體，因而可以消除固-液色譜中由于使用固相載體而帶來的吸附損失，特別適用于分離極性物質。

2、操作簡便，容易掌握：高速逆流色譜儀操作簡單，對樣品的預處理要求低，一般的粗提物即可進行的制備分離或分析。

3、回收率高：不需要固相載體，消除了由于樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解造成的損失，理論上樣品的回收率可達。在實驗中只要調(diào)整好分離條件，一般都有很高的回收率。

4、重現(xiàn)性好：如果樣品不具有較強的表面活性作用，酸堿性也不強，即使多次進樣，其分離過程都保持很穩(wěn)定，而且重現(xiàn)性相當好。

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