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高速逆流色譜儀的主要原理介紹

閱讀:2292發布時間:2022-8-16

高速逆流色譜法 (High-speed Countercurrent Chromatography,簡稱HSCCC),是一種連續高效的液液分配色譜技術,與其它色譜技術不同的是它不需任何固態載體,因此能避免固相載體表面與樣品發生反應而導致樣品的污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響。同時它也具有適用范圍廣、快速、進樣量大、費用低、回收率高等優點。因此,己在生物、醫藥、食品、材料、化妝品和環保等領域獲得了廣泛的應用,尤其是在天然產物活性成分的分離純化領域受重視。
應用范圍廣,適應性好。由于溶劑系統的組成與配比可以是無限多的,因而從理論上講HSCCC適用于任何極性范圍的樣品的分離,所以在分離天然化合物方面具有其獨到之處。并因不需固體載體,而消除了氣液色譜中由于使用載體而帶來的吸附現象,適用于分離極性物質和其它具有生物活性的物質。
原理
在對旋轉管的流體動力平衡進行研究時,偶然發現了高速逆流色譜法,其為建立于單向性流體動力平衡體系之上的一種逆流色譜分離方法。當使用緩慢的速度轉動螺旋管時,螺旋管中的兩相由一端分布到另一端,將其中一相當作移動相,由一端往另一端洗脫時,在螺旋管里,另一相的保留值約為一半,然而隨著移動相流速的增大,這一保留量會減小,從而降低了分離效率。然而加快螺旋管的轉速,會改變兩相的分布,當轉速達到臨界范圍時,沿螺旋管長度兩相就會*分開,其中首端的一段會由某一相全部占據,這一段被叫做首端相,尾端的一段由另一段全部占據,這一段被叫做尾端相。兩相的這種單向性分布特征正好為高速逆流色譜所利用。在高的螺旋管轉動速下,若由首端相往尾相送入,其將穿過首端相往螺旋管的尾端移動。當分離時,先將其中的一相(固定相)注入到螺旋管內,之后將移動相由合適的一端泵入,使其載著樣品在螺旋管中無限次的分配。固定相隨著儀器的轉速越快,保留的越多,也就會有越好的分離效果,并且使分離速度得到大大地提高,所以叫做高速逆流色譜。
應用領域:
(1)天然產物已知有效成分的分離純化
(2)化學合成物質的分離純化
(3)中藥指紋圖譜和質量控制研究
(4)抗生素的分離純化
(5)天然產物未知有效成分的分離純化(新化合物開發)
(6)海洋生物活性成分的分離純化
(7)放射性同位素分離
(8)多肽和蛋白質等生物大分子分離以及手性分離等。 

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