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內毒素的檢測——鱟試驗法

時間:2022/8/3閱讀:1615
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內毒素為革蘭氏陰性細菌及其它一些微生物如衣原體、立克次氏體、螺旋體、單核細胞增多李斯特菌等胞壁中的類脂多糖(LipopolysaccharideLPS)成分。內毒素對機體有極為廣泛的作用,可影響到機體幾乎每一個器官、系統及生物功能。內毒素對機體有多種毒害作用,如熱原性,致死作用,白細胞減少及增多,斯氏反應,彌漫性血管內凝血(DIC),骨髓壞死,胚胎骨質耗損,血壓下降,血小板凝聚,補體激活Hageman因子激活,誘導血漿原激活劑促進前列腺素的合或抑制糖原異生的關鍵骨骼肌加速釋放氨基酸等等。因此,臨床上革蘭氏陰性菌感染或膿毒癥時,如并發毒血癥和內毒休克可有許多病理現象出現。最終可因心、腎、肺、肝等功能的衰竭而發生死亡。

 

由于很小劑量的內毒素即能引起極廣泛的生物作用及病理作用因此,加強對內毒素檢測的研究便成為臨床、公共衛生、藥檢系統等領域的重要課題之一。在臨床上加強對革蘭陰性菌感染或革蘭氏陰性菌菌血癥、膿毒癥時血清中內毒素檢測有利于及時發現內毒素休克的發生,以迅速采取果斷的治療。在公共衛生及藥檢系統等面,對水源、食品、飲料、各種藥物及生物制品進行內毒素檢測,可嚴格控制水源水、食品、飲料、各種藥物、生物制品中的內毒素含量,以將其控制在可接受的法定水平以下,有利于保證人民的身體健康。

 

 

鱟試驗法

 

LT法又稱變形細胞溶解物試驗Limulus amoebocyte lysateLAL,是目前檢測內毒最敏感的方法。它比RT法敏感10100倍以上,可測出微量的內毒素(0.011 ng/m1 ) 用微光電法及其它的改進方法可測到微微克Pg/ml的水平。而在RT法中敏感性高的家兔需注射1.5ng/kg才能引起發熱而敏感性低的卻需注射0.5-10ug/ kg才能引起發熱。

 

LT法可廣泛地用于蘭氏陰性菌感染的快速診斷,對患者的血液、尿液及腦脊液可進行直接的檢查。此法亦可用于檢查各種注射劑內是否有內毒素污染。近十多年來,隨著各種先進的手段如同位素標記技術光電技術、免疫電泳技術等應用LT領域使LT法得到了許多改進,敏感性又日益提高。

 

總之,從目前來看,LT法為檢測內毒素的最好方法。其主要優點就是敏感性高假陽性少,耗費的試劑量少,且設備簡單實驗時間短,適用于臨床、衛生事業及藥檢系統大規模地進行。如能解決好試劑、內毒素及操作程序的標化問題,則LT法將是檢測內毒素的最好方法。

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