pGM-Simple-T Fast Vector是基于pGM-T Vector改良的一種高效克隆PCR產(chǎn)物的載體，經(jīng)由克隆質(zhì)粒在XcmI內(nèi)切酶酶切后得到的帶3’ T突出末端的線性化載體，通過該方法產(chǎn)生的帶有3’ T突出末端的線性化載體效率遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)酶切加尾法。由于大部分耐熱聚合酶反應(yīng)時都會在PCR產(chǎn)物的3’端添加一個A，可與pGM Simple -T Fast Vector 3’端的T互補(bǔ)連接。此外，pGM-Simple-T Fast Vector突變掉pGM-T Vector的多克隆位點(diǎn)，以方便自行引入酶切位點(diǎn)。

試劑盒中配備了新型的RapiLigation Mix（目錄號：RT407）為高效的T4 DNA連接酶反應(yīng)試劑，其中含有連接增強(qiáng)劑、酶穩(wěn)定劑，可大大縮短連接時間、提高PCR產(chǎn)物的連接和克隆效率。按不同需要配備了DH5?感受態(tài)細(xì)胞以及對照用超螺旋質(zhì)粒，方便進(jìn)行轉(zhuǎn)化。帶有插入片段的重組子可根據(jù)α互補(bǔ)原理，進(jìn)行藍(lán)白斑篩選，判斷載體中有無外源基因的插入（白色克隆為陽性重組克隆，藍(lán)色的為載體自連的克隆，具體篩選原理參考分子克隆等書籍）。克隆后，可使用通用引物T7、SP6進(jìn)行鑒定和測序。

產(chǎn)品特點(diǎn)

高效快速： 5 min快速連接，陽性率近100%。

靈敏廣泛：適合低至0.025 pmol濃度片段和長至8 kb片段的高效連接。

無多克隆位點(diǎn)： 載體自身無多克隆位點(diǎn)，方便自行引入酶切位點(diǎn)。

載體圖譜

pGM-Simple-T Fast Vector多克隆位點(diǎn)