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BY-0109 A875人黑色素瘤細胞系

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A875人黑色素瘤細胞系

       A875人黑色素瘤細胞系自建立以來,成為黑色素瘤基礎研究與藥物開發的重要模型。該細胞系源于人體黑色素瘤組織,因其du特的生物學特性,為揭示黑色素瘤惡性進展機制、評估抗癌藥物療效提供了關鍵研究對象。

      在細胞生物學特性上,A875 細胞呈梭形或不規則多邊形,具有典型的上皮 - 間質轉化(EMT)特征,細胞極性喪失,間質標志物波形蛋白(Vimentin)呈強陽性表達。其高表達黑色素瘤相關抗原(MAGE)和小眼畸形相關轉錄因子(MITF),MITF 表達水平約為正常黑素細胞的 8 倍,驅動細胞內黑色素合成通路。A875 細胞還過表達絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路中的關鍵蛋白,BRAF V600E 突變率高達 90%,該突變使 BRAF 蛋白持續激活,下游 MEK 和 ERK 磷酸化水平提升 200%,推動細胞異常增殖。實驗數據顯示,A875 細胞的倍增時間僅為 24 小時,在軟瓊脂克隆形成實驗中,單個細胞可形成平均直徑 1.2mm 的克隆,克隆形成率達 45% 。在侵襲轉移能力方面,Transwell 實驗中,A875 細胞穿過 Matrigel 基質膠的數量是正常黑素細胞的 12 倍;劃痕愈合實驗表明,其傷口閉合速度達 72μm/h。動物實驗證實,皮下接種 5×10?個 A875 細胞,10 - 14 天即可形成直徑超 8mm 的實體瘤,且易發生肺轉移,肺部轉移灶檢出率高達 75%。
       A875 細胞的培養需要精準把控條件。常用含 10% 胎牛血清(FBS)、1% 雙抗(青mei素 - 鏈mei素)的 RPMI 1640 培養基,FBS 提供的胰島素和轉鐵蛋白可協同支持細胞生長。培養環境需維持在 37℃、5% CO?的恒溫培養箱中,當細胞融合度達到 80% - 90% 時,按 1:3 - 1:4 比例傳代,使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化細胞,傳代周期約 3 天。新接種細胞 2 - 4 小時開始貼壁,12 小時內基本完成貼壁過程。培養過程中,需每日在顯微鏡下觀察細胞形態,每 2 - 3 天更換一次培養液,嚴格執行無菌操作,防止真菌、支原體污染,一旦污染,細胞生長速度將下降 60% 以上,形態出現明顯異常。
      在黑色素瘤研究領域,A875 細胞系成果豐碩。在機制研究方面,研究人員利用該細胞系發現,微小 RNA - 211(miR - 211)通過靶向調控凋亡相關蛋白 Bim,抑制細胞凋亡,促進 A875 細胞存活;長鏈非編碼 RNA LncRNA - MALAT1 可通過與 EZH2 結合,上調 SOX2 表達,增強細胞的干性和侵襲能力。在藥物研發層面,A875 細胞系是評估 BRAF 抑制劑、MEK 抑制劑等靶向藥物的核心模型。例如,維莫非尼(Vemurafenib)在 A875 細胞中的 IC??值為 0.3μM,可顯著抑制細胞增殖,誘導 30% 的細胞發生凋亡;聯合使用 MEK 抑制劑曲美替尼(Trametinib),能使細胞凋亡率提升至 55%。在免yi治療研究中,基于 A875 細胞構建的腫瘤模型,成功驗證了 PD - 1 抑制劑聯合 CTLA - 4 抑制劑的協同抗腫瘤效果,腫瘤體積縮小率達 60%。不過,使用 A875 細胞系時需注意,長期傳代可能導致基因突變積累,實驗前需通過短串聯重復序列(STR)分析、BRAF 基因突變檢測等手段進行嚴格鑒定,確保細胞系的遺傳穩定性和實驗數據可靠性。
      以上信息僅供參考,詳細信息請聯系我們。


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