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BY-0110 Caco-2人結直腸腺癌細胞系

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Caco-2人結直腸腺癌細胞系

      Caco-2人結直腸腺癌細胞系于 1978 年從一名 72 歲男性結直腸癌患者的腫瘤組織中分離建立,因其du特的生物學特性,成為腸道生理與病理研究、藥物開發領域的 “黃金模型”。該細胞系的誕生,填bu了體外模擬腸道環境研究的空白,極大推動了腸道相關科學研究的發展。

      在細胞生物學特性方面,Caco-2 細胞呈現典型的上皮樣形態,在培養過程中會自發進行腸上皮細胞分化。當細胞融合后,經 21 - 28 天培養,可形成具有極性的單層細胞,分化出微絨毛、緊密連接和刷狀緣等結構,表達多種腸上皮特異性蛋白,如堿性磷酸酶(ALP)、二肽基肽酶 IV(DPP-IV)和葡萄糖轉運蛋白 1(GLUT1),這些特征使其能高度模擬小腸上皮細胞的結構與功能。此外,Caco-2 細胞還表達多種藥物轉運蛋白,如 P - 糖蛋白(P-gp)、有機陰離子轉運多肽(OATP)家族等,為研究藥物腸道吸收與轉運提供了便利。從增殖能力來看,Caco-2 細胞的倍增時間約為 72 小時,生長相對緩慢。在侵襲能力檢測中,Transwell 實驗顯示,其穿膜細胞數較正常腸上皮細胞高出 4 - 6 倍;在三維培養體系中,Caco-2 細胞可形成類似腫瘤球體的結構,展現出惡性腫瘤細胞的特性。
      Caco-2 細胞的培養需遵循特定的規范。基礎培養基一般選用含 10% 胎牛血清(FBS)、1% 雙抗(青mei素 - 鏈mei素)的 DMEM 培養基。培養環境為 37℃、5% CO?的恒溫培養箱。當細胞融合度達到 70% - 80% 時,按 1:3 - 1:4 的比例進行傳代,使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化細胞,傳代周期約 5 - 7 天。若用于模擬腸上皮細胞功能研究,需在細胞融合后繼續培養 21 - 28 天以誘導其充分分化。培養過程中,需定期更換培養液,每 2 - 3 天更換一次,同時嚴格進行無菌操作,防止細菌、真菌及支原體污染,避免影響細胞分化和實驗結果。此外,由于 Caco-2 細胞分化時間較長,需密切監測細胞狀態,防止因過度培養導致細胞衰老或凋亡。
      憑借高度模擬小腸上皮的特性,Caco-2 細胞系在多個領域發揮著重要作用。在藥物研發中,它是評估藥物腸道吸收、預測體內藥代動力學的關鍵工具。通過測定藥物在 Caco-2 細胞單層的跨膜轉運速率,可評估藥物的吸收特性,例如硝苯di平在 Caco-2 細胞中的表觀滲透系數(Papp)較高,預示其腸道吸收良好;而某些多肽類藥物因受 P-gp 外排作用,Papp 值較低,吸收較差。在腸道疾病研究方面,科研人員利用 Caco-2 細胞研究結直腸癌的發病機制,發現 Wnt/β-catenin 信號通路的異常激活可促進 Caco-2 細胞的增殖與遷移;同時,該細胞系也用于研究炎癥性腸病中腸道屏障功能的改變,如腫瘤壞死因子 -α(TNF-α)處理后,Caco-2 細胞的緊密連接蛋白表達下降,細胞通透性增加。在新型治療策略探索中,基于 Caco-2 細胞模型,研究人員驗證了納米顆粒載體遞送藥物的有效性,以及 RNA 干擾技術對特定基因的沉默效果,為腸道疾病的治療提供了新思路。不過,使用 Caco-2 細胞系時需注意,不同培養代數和分化程度的細胞,其生物學特性可能存在差異,實驗前需通過檢測 ALP 活性、Western blot 分析緊密連接蛋白表達等方法,對細胞狀態進行嚴格鑒定,確保實驗結果的可靠性和可重復性。
     以上信息僅供參考,詳細信息請聯系我們。 


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