BY-0107 A-431人皮膚鱗癌細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0107
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/6/6 10:19:09
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A-431人皮膚鱗癌細胞系
A-431人皮膚鱗癌細胞系于 1973 年從一位 85 歲女性表皮樣癌患者病灶中分離建立，作為皮膚癌研究的經(jīng)典模型，其高 EGFR 表達特性為靶向治療探索提供了關(guān)鍵載體。該細胞系的建立，不僅推動了皮膚鱗癌發(fā)病機制研究，更為全球范圍內(nèi)抗 EGFR 藥物研發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
在細胞生物學(xué)特性方面，A-431 細胞呈現(xiàn)多邊形上皮樣形態(tài)，以緊密簇狀或片狀貼壁生長。其最tu出特征為表皮生長因子受體（EGFR）的超量表達，每細胞表面受體密度高達 5×10^6 個，約為正常細胞的 200 - 300 倍。這種過表達使細胞對 EGF 的親和力顯著增強，結(jié)合常數(shù)（Kd）達 1.5 nM，遠低于正常細胞。當 EGF 與受體結(jié)合后，PI3K/Akt 和 MAPK 通路被迅速激活，促使細胞周期蛋白依賴性激酶（CDK）活性提升 60%，推動細胞從 G1 期向 S 期快速轉(zhuǎn)換。實驗數(shù)據(jù)顯示，在添加 10 ng/mL EGF 的培養(yǎng)基中，A-431 細胞的 DNA 合成速率提升 45%，72 小時細胞數(shù)量可達對照組的 2.3 倍。在侵襲能力方面，Transwell 實驗中，A-431 細胞穿過 Matrigel 基質(zhì)膠的數(shù)量是 HaCaT 正常角質(zhì)形成細胞的 7.8 倍；劃痕愈合實驗表明，其傷口閉合速度達 56 μm/h，展現(xiàn)出ji強的遷移能力。動物實驗證實，皮下接種 1×10^6 個 A-431 細胞，7 - 10 天即可形成直徑超 5 mm 的實體瘤，成瘤率穩(wěn)定在 97% 以上。
A-431 細胞的培養(yǎng)需嚴格把控條件。推薦使用含 10% 熱滅活胎牛血清（FBS）、1% 雙抗（100 U/mL 青mei素與 100 μg/mL 鏈mei素）的高糖 DMEM 培養(yǎng)基，其中 FBS 提供的胰島素樣生長因子（IGF）可協(xié)同 EGF 增強細胞活性。培養(yǎng)環(huán)境設(shè)定為 37℃、5% CO?、95% 相對濕度，當細胞融合度達 80% 時，以 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 按 1:3 比例傳代，傳代周期約 3 天。復(fù)蘇后細胞 2 小時開始貼壁，24 小時貼壁率超 90%。需特別注意，過高的細胞密度（＞90% 融合度）會導(dǎo)致接觸抑制，使 EGFR 表達量下降 15% - 20%，影響實驗結(jié)果。日常培養(yǎng)中，應(yīng)每日通過相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)，若出現(xiàn)細胞間隙增大、折光性減弱等現(xiàn)象，需警惕支原體污染，可采用 PCR 法進行快速檢測。
在科研與藥物開發(fā)領(lǐng)域，A-431 細胞系發(fā)揮著不可替代的作用。在機制研究層面，最新研究發(fā)現(xiàn)長鏈非編碼 RNA LINC00665 通過海綿吸附 miR-125b，解除對 EGFR 的抑制，使 A-431 細胞的遷移能力提升 38%。在藥物篩選方面，該細胞系已驗證吉非ti尼、西妥昔單抗等 20 余種 EGFR 靶向藥的有效性，其中新型雙特異性抗體 Amivantamab 在 A-431 模型中，可使細胞增殖抑制率達 82%，誘導(dǎo) 35% 的細胞發(fā)生凋亡。在新興治療技術(shù)探索中，基于 A-431 構(gòu)建的 3D 腫瘤球模型，成功驗證了納米顆粒負載的 siRNA 對 EGFR 的沉默效果，為 RNA 干擾療法的臨床轉(zhuǎn)化提供數(shù)據(jù)支持。不過，由于該細胞系存在基因漂移風險，建議每 20 代進行 STR 分型鑒定，并與 ATCC 標準圖譜比對，確保細胞系的遺傳穩(wěn)定性。
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