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產品分類：固定液

儲存條件：室溫,12個月

用途：植物材料固定液

注意事項：主要由乙醇、丙酸、甲醛等組成。用于固定一般的植物材料,24H固定后效果比FAA固定液更好,并可長期保存材料。

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

返魂草（麻葉千里光）（標準品） Sodium glycodeoxycholate磷化蛋白酪激JAK-2抗體包裝1g

芳樟(標準品) Sodium taurochenodeoxycholate凋亡清除受體抗體包裝1g

防風（標準品） glycodeoxycholicacid磷化原癌基因c-Jun抗體包裝250mg

防己諾林堿（標準品） TunicamycinNotch配體Jagged 2蛋白抗體包裝5g

防已（標準品） Scopolamine methyl bromide組蛋白去基化Jarid1C抗體包裝1g

飛龍掌血根皮（標準品） Sodium deoxycholate組蛋白去基轉移JMJD1B抗體包裝5g

飛揚草（標準品） Tauroursodeoxycholic Acid Dihydrate親聯蛋白2抗體包裝25g

洲防己堿(標準品) Tauroursodeoxycholic Acid Sodium Salt 驅動蛋白家族蛋白13B抗體包裝100mg

榧子（標準品） Novobiocin sodium驅動蛋白家族蛋白7抗體包裝1g

粉萆薢（標準品） SulfamerazineCREB結合蛋白抗體包裝500mg

粉防己堿;漢防己(標準品) Validamycin腦蛋白9抗體包裝5g

楓香脂（標準品） Phleomycin絲裂原誘導蛋白2抗體包裝25g

蜂房（標準品） Oligomycin, from Streptomyces鋅指蛋白393抗體包裝5g

蜂膠（標準品） Netropsin dihydrochloride組蛋白賴特異性脫基1抗體包裝25g

鳳尾草（標準品） Cephalosporin C zinc salt驅動蛋白樣蛋白1抗體（狀腺激受體相互作用蛋白5）包裝5g

神戶類芽孢桿菌Paenibacillus│kobensis 質量規格：>95.0%(HPLC),BR,可用于培養抗中性粒核周抗體試劑盒根薯內酯B;Taccalonolide

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格：>99%,USP33,BR抗中性粒胞漿抗體試劑盒根薯內酯A;Taccalonolide

北里鏈霉菌Streptomyces│kitasatoensis 質量規格：HPLC>98%,標準品抗中性粒/中心體抗體試劑盒D-果糖;D(-)-Fructose
FPA固定液ANG  人血管緊張su規格： 48T

BCL-2(humen)  人細胞凋亡相關基因BCL-2規格： 48T

P-Cadherin  人P-鈣粘附蛋白規格： 48T

Calcitonin  人降鈣su規格： 48T

AMA(mitochon-drial body)  人抗線粒體規格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。