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色譜柱常見問題(七)
2020年07月20日 08:46:43 來源:化工儀器網 點擊量:8563

會使用色譜儀,不代表對了解色譜儀,尤其是色譜儀的各種配件。色譜柱作為色譜系統的心臟,越了解它,就能更好的掌握色譜儀。

  【化工儀器網 技術指導】會使用色譜儀,不代表對了解色譜儀,尤其是色譜儀的各種配件。色譜柱作為色譜系統的心臟,越了解它,就能更好的掌握色譜儀。
 
  1、柱子才用了四個月出現峰形拖尾現象,是什么原因?
 
  用了四個月峰形拖尾是很正常的,需要維護清洗一下色譜柱,清除引起拖尾的柱頭污染。如果柱頭塌陷,可以從其它廢柱子里取點填料填補塌陷,但效果不一定好。
 
  2、流動相里有酸,單純用乙腈沖洗能把酸沖洗干凈嗎?
 
  流動相里有酸,應該先用純水或80:20的水/乙腈溶劑沖洗。如果一直在酸性環境,固定相容易流失,造成保留時間前移和其它色譜性能下降。
 
  3、C18和RP18有什么區別,在檢測三聚氰胺時為什么結果響應值不同?
 
  RP18就是C18。不過C18柱之間也有區別,測定三聚氰胺一般要用極性比較大的水性C18柱。
 
  4、磺化交聯的苯乙烯-二乙烯基共聚物為填充劑的色譜柱沒有儲存冰箱中,發霉后可以將此色譜柱修復好嗎?
 
  聚合物柱子因為不怕酸堿,就直接用強酸強堿清洗。如果是H型,用1M硫酸沖洗;如果是Ca型,可以先用1M硫酸沖洗,再用EDTA鈣鹽轉換回Ca型柱;如果是中性的聚合物反相柱,直接用1M的NaOH沖洗。
 
  5、柱子的柱效影響大嗎?一般柱子的柱效規定是多少?
 
  柱效是柱子性能好壞的一個重要體現指標。柱效會影響分離度,當然是峰形越尖銳,柱效越高,和其它峰越容易分開。另外柱效高峰形尖銳,對峰面積的積分誤差就小,甚至可以用峰高來定量。一般C18柱,在測定甲苯等不易拖尾的小分子中性不電離物質時,5um的填料,每米的柱效能達到80000以上的塔板數,就算合格。在實際分析物的測定時,一般藥典有規定低柱效是2000-3000,新柱子的柱效都高于這個數。
 
  6、流動相中加入四氫呋喃對柱子有損害嗎?
 
  四氫呋喃(THF)是反相色譜中洗脫能力極強的溶劑。在流動相中加入THF能改善某些難分離的物質對的分離度,但THF不穩定,容易降解生成具有很強反應活性的過氧化物,能與分析物反應生成新化合物,導致拖尾、峰分裂和鬼峰產生。
 
  THF對柱子有損傷這點是無疑的,但這種損傷是隨時間累積的。THF放得越久,產生的過氧化物含量越大,因此應該避免使用生產很久的THF溶劑,而且好將THF冷藏、干燥和避光保存,使用前檢測一下過氧化物的含量。
 
  7、哪些原因會造成色譜峰變寬、峰高變低?
 
  如果其它色譜條件沒有改變,柱效下降是導致峰變寬的主要原因。對于易電離的極性物質,如果流動相pH選擇不合適,分析物既有中性分子態存在,又有離子態存在,峰也會變寬變矮。色譜柱使用后柱效逐步下降是正?,F象,如突然降低則屬異常,多半是因為使用不當,造成填料特性或柱床結構改變所致。
 
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